丙戊酸钠对人肝癌SMMC-7221细胞的放疗增敏作用研究

【摘要】目的：原发性肝细胞癌（hepatocellularcarcinoma，HCC）是威胁人类的生命健康的难治性疾病，具有易转移、易复发、预后差和高辐射抗性等特点。放射治疗(radiotherapy，RT)能有效的杀伤癌细胞和延缓患者生命。临床研究表明正常肝细胞对电离辐射（ionizngradiation，IR）呈现较高的辐射敏感性，患者在接受常规RT后容易诱发辐射诱导肝病(RadiationInducedLiverDisease,RILD),然而HCC却具有较高的辐射抗性。HCC的放射敏感性与癌细胞的分化程度、乏氧情况和肝癌干细胞(LiverCancerStemCells,LCSCs)、DNA损伤(DNADouble-StrandedBreaks,DSBs)和修复机制(DNArepairmechanism)、微小RNA(MicroRNAs,miRNAs)、信号通路（signalpathway）异常表达相关。实体瘤瘤体内部普遍呈现乏氧（hypoxia）状态，乏氧也是导致肿瘤放射抵抗的重要原因。增加乏氧细胞放射敏感性的方法包括：增大放疗剂量、联合使用放射增敏剂（radiosensitizer）、放疗联合化疗等。丙戊酸钠（ValproicAcid，VPA）不仅具有抗癫痫作用，而且还能诱导肿瘤细胞周期阻滞、抑制细胞的分裂增殖和促进其凋亡。VPA能增加食管癌细胞、胶质瘤细胞、前列腺癌细胞等肿瘤细胞的放射敏感性。然而VPA是否能增加人肝癌SMMC-7221细胞的放射敏感性仍没有文献报道，本实验以VPA作为人肝癌SMMC-7221细胞的放疗增敏剂，观察其放疗增敏作用，并深入探讨了其可能的作用机制，为临床肝癌放疗增敏提供实验依据。方法：选取5个不同的VPA药物浓度(0.75、1.5、3.0、6.0和8.0mmol/L)作用24h、48h和72h后，用MTT法检测VPA对人肝癌SMMC-7221细胞的增殖抑制作用，筛选出VPA的半数抑制浓度(IC50)。克隆形成实验检测VPA的放射增敏作用。流式细胞仪(FCM)检测肝癌SMMC-7221细胞的凋亡水平变化和细胞周期分布变化。结果：MTT实验显示在经过VPA处理24、48、72小时后，SMMC7221细胞的增殖受到明显抑制，具有浓度和时间依赖性。VPA作用SMMC-7221细胞24、48、72小时的IC50分别为41.26、9.04、2.87mmol/L。和对照组相比，IR组、VPA组和VPA+IR组SMMC-7221细胞凋亡率均显著升高（P<0.05）。VPA+IR组凋亡率亦明显高于IR组和VPA组（P<0.05）。和对照组相比，IR组、VPA组和VPA+IR组均不同程度增加了SMMC-7221细胞G0/G1期细胞比例，降低了S期细胞比例，对G2/M期没有显著影响。结论：VPA对人肝癌SMMC-7221细胞有显著的增殖抑制作用，并且呈现浓度和时间依赖性。VPA对人肝癌SMMC-7221细胞的毒性作用较低，但是具有显著的放射增敏作用，其放射增敏机制与细胞凋亡水平增加和细胞周期阻滞密切相关。
【作者】陈诚；
【导师】刘亚辉；
【作者基本信息】吉林大学，临床医学，2014，硕士
【关键词】肝癌；丙戊酸钠；放疗增敏；细胞凋亡；细胞周期；

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